顯微鏡下觀察細胞吹打更容易成功的經(jīng)驗

方法一：
1.用力不能太猛，要均勻吹打；
2.按順序從上到下，從右到左，每個地方都吹到。
3.盡量不要吹起泡沫，有少量問題也不大。
4.吹打的次數(shù)有時候與胰酶有關系。我們一般是冷胰酶消化0.5-1min（A549，2BS，HepG2都試過了），15-20次也夠了。
過度吹打會損害細胞，會影響培養(yǎng)基的pH值...，但是，如果不充分吹打，消化后細胞還是有好多貼在壁上
在75ml培養(yǎng)瓶的不同部分吹打，總共15次，然后在解剖顯微鏡下觀察，細胞99％吹打下來了，狀態(tài)也不錯。

方法二：
用預熱胰酶加入1ml，然后倒掉0.5ml左右，再等待2min左右就可以了，大約吹打15次就OK
其實帖壁生長細胞消化傳代并不是借助吹打的力量才使細胞離壁，關鍵是消化。
消化要到位，然后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基，搖晃培養(yǎng)瓶，使細胞借助培養(yǎng)液打擊的力量脫落。
然后用槍吹幾次培養(yǎng)液，把仍沒有成單個的細胞吹成單個。
我覺得這樣對細胞損傷很小。

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