使用活細胞成像技術在生物醫學研究的爆炸性增長已推動相結合的活動，包括在共聚焦顯微鏡儀器戲劇性的進步，再加上引進新型超靈敏探測器和持續改進的熒光蛋白基因編碼的性能。揭示復雜的生物動力學的毫秒時間尺度上的活細胞中獲取本地化的熒光圖像，提出了新的挑戰的主機，這是遠遠超過傳統創建一個單一的高分辨率染色的固定組織的快照。
為了保證高圖像采集速度和合理的對比度和較小的漂白活細胞熒光蛋白的合成染料，顯微鏡必須能夠快速掃描領域的觀點和記錄數據使用探測器量子效率高。
激光掃描共聚焦顯微鏡的重點單梁試樣的平面上，依次指向掃描的利益與地區發射光的空間過濾，拒絕來自重點地區的光通過一個單一的針孔。
