直接細(xì)胞計(jì)數(shù)或測(cè)量細(xì)胞光度測(cè)定分析顯微鏡
光度測(cè)定法
光度測(cè)定法用于測(cè)定促進(jìn)生長(zhǎng)的和抑制生長(zhǎng)的物質(zhì)。測(cè)定促進(jìn)生
長(zhǎng)的物質(zhì)的實(shí)例
雖然此處介紹的測(cè)定實(shí)例利用青霉素G的測(cè)定作為一個(gè)樣板,但是
,此法很容易加以改變,用于其他抗生素的測(cè)定.對(duì)金黃色葡萄球菌
有抑制活性的大多數(shù)物質(zhì),都可以通過(guò)改變標(biāo)準(zhǔn)品及其濃度范圍,在
青霉素系統(tǒng)中進(jìn)行測(cè)定。表2-7中的數(shù)據(jù),正是通過(guò)改變活性物質(zhì)的青
霉素系統(tǒng)酌——種變化而獲得的。正如前面討論過(guò)的那樣,如果緩沖
液和培養(yǎng)基的pH發(fā)生改變,大多數(shù)抗生素的濃度范圍也將不同
對(duì)革蘭氏陰性菌有抑制活性的抗生素,通常應(yīng)該藉助一種革蘭氏
陰性菌進(jìn)行測(cè)定
因?yàn)閷?duì)大量樣品而言,比濁測(cè)定法比直接細(xì)胞計(jì)數(shù)或測(cè)量細(xì)胞的
干重更為方便,所以,細(xì)胞增殖作為一種測(cè)定反應(yīng),常常根據(jù)比濁法
測(cè)量的一些形式來(lái)進(jìn)行定量測(cè)定。
比濁度的最簡(jiǎn)單的形式是終點(diǎn)試驗(yàn),其反應(yīng)以全或無(wú)的形式記錄
下來(lái)。這就是在血清學(xué)中廣泛應(yīng)用的系列稀釋試驗(yàn)。此法是早期抗生
素研究工作中應(yīng)用的一種試驗(yàn)。在分離步驟基本上是全或無(wú)的情況下
,如同在很多溶劑抽提步驟中那樣,系列稀釋試驗(yàn)是可以滿足要求的
。
在小試管中的幾種不同稀釋度的抗細(xì)菌物質(zhì),接種入測(cè)定·菌,
保溫培養(yǎng)。能夠明顯地引起測(cè)定菌生長(zhǎng)的完全抑制的抗細(xì)菌物質(zhì)的最
低抑制濃度,被定義為最低抑制濃度。該化合物的活·性, 由最低
抑制濃度進(jìn)行計(jì)算,可以用毫克/毫升的物質(zhì)表示。對(duì)于很多方面的
目的而言,由此得到的結(jié)果與由更為費(fèi)力的平板法!或比濁測(cè)定法得出
的結(jié)果一樣有用。
簡(jiǎn)單的雙重系列稀釋法得出稀釋度的一個(gè)幾何級(jí)數(shù),它的結(jié)·果
在所報(bào)道的濃度和其一半的濃度之間。根據(jù)推測(cè),結(jié)果可以是上述二
濃度之間的任何數(shù)值。因此,系列稀釋法具有很大的、固有的易變性
,不適宜進(jìn)行精確的定量測(cè)定。