直接鏡檢法由于各類(lèi)細(xì)菌培養(yǎng)基分析顯微鏡
采用目鏡計(jì)數(shù)網(wǎng)計(jì)算
此法一般不必把水樣稀釋,只將一定量的水樣涂開(kāi),染色放在油鏡下
直接觀察,若采用染色法可區(qū)別死活孢子,可計(jì)數(shù)活孢子,比應(yīng)用平板培
養(yǎng)法計(jì)數(shù)活孢子來(lái)得快捷,在實(shí)用上有一定價(jià)值。操作步驟如下:
(1)用蠟筆在4片載玻片中段劃邊長(zhǎng)為2或厘米的止方形,即面積為4或1
平方厘米。
(2)分別用4支無(wú)菌移液管吸四種水樣各0.01毫升置于玻片正方形中,
涂滿整個(gè)正方形面積然后按單染色法,用石炭酸復(fù)紅染色劑或草酸銨緒
晶紫染色
(3)將染色片放于油鏡下觀察:計(jì)算出目鏡計(jì)數(shù)網(wǎng)中每小格的平均菌落
。用測(cè)微尺標(biāo)定目鏡計(jì)數(shù)網(wǎng)格在視野中的邊長(zhǎng)。
超濾膜直接鏡檢法由于各類(lèi)細(xì)菌不能在一種培養(yǎng)基上長(zhǎng)出,上述所
計(jì)算的,雖然是活菌,但所計(jì)算的菌數(shù)可能偏少。超濾膜直接鏡檢法可
用來(lái)計(jì)算水樣中的各種細(xì)菌的總數(shù)。可是包括了死細(xì)菌,故其數(shù)量可能
偏高,操作方法如下:
(1)濾膜處理,超濾器的安裝,抽濾方法同上法
(2)用無(wú)菌移液管吸5.0―10.0毫升水樣,注入直徑為10毫米的小濾器(
能濾過(guò)細(xì)菌),加3-5倍量的無(wú)菌水稀釋,使菌體分散均勻,然后將過(guò)濾的
稀釋水樣放于超濾器抽濾濃縮,若水樣是海水,須加少量無(wú)菌蒸餾水,再
抽濾除去膜上的鹽分
(3)用石炭酸藻紅或呂弗氏美藍(lán),按前法將濾膜染色,可區(qū)別濾膜上的
菌體與無(wú)機(jī)顆粒,后者染色較深,而菌體清晰。
