熒光立體顯微鏡細菌單細胞分辨率分析顯微鏡
熒光立體顯微技術
熒光立體顯微鏡對細菌單細胞的分辨率很低,因此在微生物學研究
中的應用并不廣泛。但是,熒光立體顯微鏡能夠對植物表面的微生物集
落進行有用的初步觀察研究,例如生物膜和真菌,或者為分辨率的顯微
鏡觀察選擇組織樣品。例如,
在熒光立體顯微鏡下觀察到這些現象是可能的,這是因為大的細菌
細胞聚合體所發出的高亮度的綠色熒光,而在綠光范圍內在苜蓿芽的其
他部位僅有相對很少的自身背景熒光。
免疫電子顯微鏡
盡管在細胞成像中光顯微技術發揮著重要的作用,然而熒光顯微鏡
的分辨率仍然低于電子顯微鏡(EM)。可是,掃描電子顯微鏡(SEM)研究
顯示,植物表面的生物膜是嵌在有機物質上的多種異種微生物的復雜集
合體。對于研究者而言,令人失望的是電子顯微鏡下的植物上的絕大部
分細菌細胞仍然是未知的。幸運的是,免疫電鏡的膠體金標記技術為自
然環境中特定微生物的檢測和揭示微生物細胞更為復雜的生物學現象
提供了新的研究手段。膠體金標記技術的優點在于將分子原位定位的
高特異性與掃描電鏡的高分辨率結合起來,故在植物病理學研究中得到
了廣泛的應用。血清型的高分辨率的顯微成像。更重要的是,對鞭毛組
分進行免疫檢測使研究者能觀察到沙門菌 Thompson血清型的鞭毛是錨
定在葉面上,這表明鞭毛的作用是使細胞黏附于植物(圖26.9)。除了免
疫細胞化學外,研究者根據凝集素、酶和蛋白質等對特定分子結合的特
異性開發了很多其他的細胞化學研究方法來用于電子顯微鏡的金標記
。
